YUES无限远光学系统的分辨率
- 来源:Yuescope越视显微镜
- 发布时间:2023-09-28 11:22
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【概要描述】YUES无限远光学系统的分辨率,是指"物"在经过光学系统后的"像"在细节上能被分辨的最小距离。一般我们会用光学系统所能分辨的两个像点的最小距离来表示,大于这个距离的两个像点就能被识别为两个点,而小于这个距离的两个点经过光系统后就会被识别为一个点。而对于黑白图样(荧光样品其实也是一种黑白图样)来说,这个分辨能力也可以用单位距离里内能够分辨的黑白线对数来表示,间隔越宽的黑白条纹越容易分别(想象一下细胞的Lamellipodia和Filopodia的差别)。
YUES无限远光学系统的分辨率
【概要描述】YUES无限远光学系统的分辨率,是指"物"在经过光学系统后的"像"在细节上能被分辨的最小距离。一般我们会用光学系统所能分辨的两个像点的最小距离来表示,大于这个距离的两个像点就能被识别为两个点,而小于这个距离的两个点经过光系统后就会被识别为一个点。而对于黑白图样(荧光样品其实也是一种黑白图样)来说,这个分辨能力也可以用单位距离里内能够分辨的黑白线对数来表示,间隔越宽的黑白条纹越容易分别(想象一下细胞的Lamellipodia和Filopodia的差别)。
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YUES无限远光学系统的分辨率,是指"物"在经过光学系统后的"像"在细节上能被分辨的最小距离。一般我们会用光学系统所能分辨的两个像点的最小距离来表示,大于这个距离的两个像点就能被识别为两个点,而小于这个距离的两个点经过光系统后就会被识别为一个点。而对于黑白图样(荧光样品其实也是一种黑白图样)来说,这个分辨能力也可以用单位距离里内能够分辨的黑白线对数来表示,间隔越宽的黑白条纹越容易分别(想象一下细胞的Lamellipodia和Filopodia的差别)。
从“物”到“像”的失真
存在这个分辨率的原因是因为光学系统的衍射和像差导致从"物"到"像"的过程中会发生"失真"。这种失真是空间上高频信号丢失所导致的(光学系统可以看作是一个空间上的低通滤波器,只能允许一定带宽范围内的空间频率信号通过),通俗的理解就是削弱了由"黑"到"白"过渡的锐度和对比度,使其变得平滑和模糊。下图所示,黑白条纹的真实灰度可以用一个方波信号表示。在经过光学系统之后,如图像 A 和下方波形所示,原始信号被"平滑",方波的每一个峰都展宽成一个贝塞尔峰,黑白相交处的信号变化斜率下降到一个固定水平(这个斜率的下降就是以该系统带宽所做的滤波效果)。
当我们将原始条纹变的密集(增加空间频率),该系统仍以固定带宽进行滤波,这样这些被展宽的峰就会互相交叠,损失重叠部分的对比度从而产生图像B的效果。如果我们换一个带宽更宽的系统 2,其信号的高频部分会被更好的保留,表现为黑白交界处的信号变化斜率更大,对比度也越接近真实情况。Yuescope显微镜为您推荐:枝晶观测显微镜
Yuescope显微镜温馨提醒:回归到我们熟悉的生物荧光成像,上述分辨率的概念通过瑞利判据与样品的发射光波长和光学系统的数值孔径相联系起来。即在传统宽场荧光下,光学系统的极限分辨率 d = 0.6λ/NA,波长越短,NA值越大,分辨率越高(可以理解为对空间高频信号的保留越充分)。
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